Количественная иммунофлуоресценция против быстрых тестов на СРБ и САА: почему многие меняют ведение случаев

Белки острой фазы: что это такое и как быстро они движутся

Когда ткань повреждена или инфицирована, макрофаги выделяют интерлейкин-6, интерлейкин-1 и фактор некроза опухоли. В течение нескольких часов печень реагирует синтезом белков острой фазы. У собак основным белком острой фазы является С-реактивный белок (СРБ); у кошек это сывороточный амилоид А (SAA), поскольку кошачий СРБ практически не перемещается. У лошади SAA снова является основным маркером.

Уровень СРБ у собак начинает повышаться через 4–6 часов после раздражителя, достигает пика через 24–48 часов, в 50–1000 раз превышая исходный уровень, а период полураспада примерно 19 часов начинает падать в течение дня после того, как воспаление удалось взять под контроль. Количество лейкоцитов меняется позже, меньше, и его ухудшают стресс и стероиды. СРБ в значительной степени не зависит от возраста, пола, породы, диеты или стресса, поэтому повышенное значение почти всегда является признаком воспаления.

SAA у кошек ведет себя таким же образом: у здоровых кошек его содержание в мг/л составляет однозначную цифру, увеличивается в десять и более раз в течение дня воспаления и быстро падает по мере его разрешения. Это маркер у кошек для тех же клинических вопросов: скрининг инфекций, послеоперационный мониторинг, панкреатит, обследование FIP и ответ на лечение.

Три способа измерения одного и того же белка

Полуколичественные кассеты с боковым потоком улавливают СРБ на полоске и сортируют тестовую линию по напечатанной шкале, обычно на три или четыре диапазона (например, ниже 10, от 10 до 30, от 30 до 100, выше 100 мг/л). Им не нужен никакой инструмент, и они дают категорию за десять минут.

Количественный флуоресцентный иммуноанализ (FIA) использует тот же метод иммунозахвата, но маркирует обнаруживаемое антитело флуоресцентным красителем и считывает полоску с помощью настольного считывателя. Калибровочная кривая для конкретной партии, загружаемая с идентификационной карты, преобразует флуоресценцию в концентрацию. Получение результатов занимает от 3 до 15 минут и охватывает клинически значимый диапазон от однозначных цифр до нескольких сотен мг/л, с коэффициентами вариации в диапазоне, ожидаемым для иммуноанализа на месте оказания медицинской помощи.

Хемилюминесцентный иммуноанализ (CLIA) является лабораторным стандартом: захват магнитными шариками и антитело, меченное ферментом или акридинием, производят свет, измеряемый фотоумножителем. Он имеет самый широкий динамический диапазон и лучшую точность на нижнем уровне за счет более крупного анализатора, жидких реагентов, более высокой цены за тест и графика технического обслуживания. Это метод выбора для определения высокочувствительного СРБ в субмиллиграммовом диапазоне и для референс-лабораторий.

Почему число имеет значение: три случая

Послеоперационный мониторинг. После неосложненной овариогистерэктомии у собак СРБ достигает максимума в первый день и в дальнейшем снижается примерно вдвое. Значение 45 мг/л в первый день и 20 во второй день соответствует нормальному выздоровлению; 45, а затем 60 — это осложнение за день до того, как рана станет выглядеть неправильно. Кассета читает обе последовательности как «умеренные» и ничего не видит.

Пиометра и сепсис. Значения выше 100 мг/л при поступлении и их динамика в течение первых 48 часов лечения отличают собаку, которая отвечает, от той, которой сегодня необходима операция или смена антибиотика. Здесь число является решением.

Иммуноопосредованные заболевания и панкреатит. Стероидную или иммуносупрессивную терапию титруют против воспаления, и уровень СРБ падает до улучшения гематологических показателей. Сочетание СРБ с количественным определением липазы поджелудочной железы (cPL, fPL) на одном и том же считывателе дает клиницисту числовую картину тяжести панкреатита и выздоровления, опять-таки невидимую на полосчатой ​​полоске.

Одно устройство чтения, один рабочий процесс, множество маркеров

Экономическое обоснование для читателя заключается в том, что дело не ограничивается CRP. Один и тот же прибор измеряет SAA, cPL и fPL, SDMA для функции почек, NT-proBNP для сердечного скрининга, прогестерон для управления потомством, общий T4 и кортизол для работы эндокринной системы, а также панели инфекционных заболеваний. Клиника, проводящая десять количественных тестов в день, амортизирует ридер за месяцы и заменяет полку одноцелевых кассет картриджами одного формата и одной тренировкой.

Куда по-прежнему принадлежат латеральный поток и хемилюминесценция

Кассета — правильный выбор для выездного ветеринара, проверки приюта или посещения фермы, где нет считывателя и стоит вопрос «воспламенено или нет». Хемилюминесценция является правильным выбором для референс-лаборатории, для исследований, а также для высокочувствительного субмиллиграммового диапазона СРБ, который пока еще не используется в рутинных ветеринарных целях. Между этими двумя сторонами повседневная работа больницы для мелких животных носит количественный, последовательный и ограниченный по времени характер, и это территория читателей иммунофлуоресценции.

Написано командой разработчиков Medicare Vet на основе данных производителя, рекомендаций WOAH и опубликованных подтверждений. Не заменяет ветеринарную или лабораторную консультацию на вашем рынке.