لوحات PCR المتعددة في الوقت الحقيقي مقابل اختبارات الهدف الواحد: اختبار المتلازمات في المختبر البيطري

لماذا المتلازمات، وليس مسببات الأمراض

تشتمل مجموعة أمراض الجهاز التنفسي المعدية في الكلاب على فيروس السل، ونظير الأنفلونزا، والفيروس الغدي من النوع 2، والأنفلونزا، وفيروس كورونا التنفسي، والبورديتيلا القصبية، والميكوبلازما سينوس، في أي مجموعة. مرض الجهاز التنفسي العلوي لدى القطط يجمع بين فيروسات الكاليسي وفيروس الهربس مع الميكوبلازما والكلاميديا ​​والبورديتيلا. يمتد إسهال القطط والكلاب إلى فيروسات البارفو، والفيروس التاجي، والجيارديا، والتريتشوموناس، والكريبتوسبوريديوم، والكلوستريديوم، والسالمونيلا. تجد الدراسات الاستقصائية للحالات السريرية بشكل روتيني عاملين أو أكثر في ثلث أو أكثر من العينات الإيجابية.

يجيب اختبار الهدف الواحد في هذا الإعداد على السؤال الذي طرحه الطبيب، وليس السؤال الذي يطرحه المريض. إن النتيجة السلبية لفيروس البارفو في القيء عند الجرو تكون مطمئنة فقط إذا كانت نتائج فيروس كورونا والجيارديا والكلوستريديوم معروفة أيضًا. تقوم اللوحة بتحويل سلسلة من التخمينات إلى إجابة واحدة مرتبة.

كيف يعمل تعدد الإرسال

يحتوي كل هدف على زوج تمهيدي خاص به ومسبار موسوم بفلوروفور مختلف: FAM، أو HEX أو VIC، أو ROX أو Texas Red، أو Cy5، وعلى أدوات ذات ست قنوات Cy5.5 أو صبغة مشابهة. يقرأ الجهاز كل قناة على حدة في كل دورة، لذلك يُبلغ البئر الواحد عن منحنى واحد لكل هدف. يحتل التحكم الداخلي، والذي عادة ما يكون جينًا مضيفًا داخليًا أو تسلسلًا صناعيًا مسننًا، قناة واحدة ويؤكد نجاح الاستخراج وعدم منع التفاعل.

أربعة إلى ستة أهداف لكل بئر هو السقف العملي لمعظم الصكوك؛ يتم بناء الألواح الأكبر حجمًا على شكل بئرين أو ثلاثة آبار لكل عينة، ولهذا السبب يتم تعبئة لوحة الجهاز الهضمي المكونة من ثمانية عناصر كأنابيب متعددة.

ما هي تكاليف تعدد الإرسال، وكيف يتم التحكم فيه

المنافسة التمهيدية. تتشارك الأهداف في البوليميراز والنيوكليوتيدات وزمن الدورة، لذا يمكن للهدف عالي الحمل أن يمنع تضخيم الهدف منخفض الحمل في نفس الأنبوب. تعمل اللوحات المصممة جيدًا على موازنة تركيزات التمهيدي وتؤكد أثناء التحقق من الصحة أن حد اكتشاف كل هدف في الإرسال المتعدد يقع ضمن دورة أو نحو ذلك من قيمة الإرسال الفردي.

الحديث المتبادل. تنزف الفلوروفورات ذات الأطياف المتداخلة إلى القنوات المجاورة؛ تتحكم معايرة الجهاز واختيار صبغ اللوحة في ذلك، ويتضمن التحقق من الصحة عينات إيجابية مفردة في كل قناة لإثبات ذلك.

تفسير. تنتج اللوحة المزيد من الإيجابيات، بعضها متكافئ أو متفرج. تم العثور على الميكوبلازما والبورديتيلا على وجه الخصوص في حاملين أصحاء، لذلك يجب أن يحمل التقرير قيمة Ct، ويجب على الطبيب قراءة Ct المتأخر على الكائن الحي الحامل بشكل مختلف عن Ct المبكر على فيروس السل.

عندما تظل المجموعة ذات الهدف الواحد هي الخيار الصحيح

تأكيد لوحة إيجابية مع اختبار مستقل. المراقبة الكمية لمسبب مرضي واحد مع مرور الوقت، مثل الحمل الفيروسي تحت العلاج، حيث يأتي المنحنى الأنظف من تفاعل مخصص. الأهداف النادرة أو الغريبة التي لا تحملها أي لوحة، بما في ذلك العوامل الحيوانية المنشأ مثل البروسيلا أو اللولبية النحيفة أو الليشمانيا حيث يكون السؤال السريري محددًا. الاختبار التنظيمي أو اختبار التصدير الذي يحدد الطريقة. وأي معمل تكون أجهزته تحتوي على قناة واحدة أو قناتين فقط.

بناء قائمة اللوحة

عادةً ما يستقر المختبر البيطري الذي يخدم الممارسة العامة على لوحة الجهاز التنفسي ولوحة الجهاز الهضمي لكل من الكلاب والقطط، ولوحة محمولة بالنواقل (إرليخيا، أنابلازما، بابيسيا، ديروفيلاريا، الليشمانيا) تم تشكيلها بواسطة خريطة القراد المحلية وذبابة الرمل، ومجموعة من مجموعات فردية للتأكيد وللأسئلة المتعلقة بالحيوانات والتكاثر. تعمل جميعها على نفس الاستخراج ونفس الأداة ونفس قالب التقارير، وهي الحجة العملية للحصول على القائمة بأكملها من كتالوج واحد بدلاً من تجميعها من خمسة موردين بخمس مجموعات رئيسية.

خطوة الاستخراج لا أحد يعلن عنها

كل لوحة تكون بنفس جودة الحمض النووي الذي يدخل فيها. يحتاج البراز والمسحات ودم EDTA إلى كيميائيات تحلل مختلفة؛ ويعطي الاستخراج الآلي للخرزات المغناطيسية عائدًا ثابتًا، ويزيل المثبطات التي تعمل على تسطيح منحنى تعدد الإرسال. ينتقل قياس المختبر من حفنة من العينات يوميًا إلى عشرات من مستخرج 4 عينات إلى 16 أو 32 أو 96، ويتم اتخاذ هذا القرار في نفس الوقت الذي يتم فيه اتخاذ قائمة اللوحة.

تمت كتابته بواسطة فريق منتج Medicare Vet بناءً على بيانات الشركة المصنعة وتوجيهات WOAH والتحقق المنشور. ليس بديلاً عن المشورة البيطرية أو المخبرية في السوق الخاص بك.