التضخيم متساوي الحرارة مقابل التدفق الجانبي مقابل PCR المختبري: اختيار الاختبار المناسب للأمراض المعدية في الكلاب والقطط

ما تكتشفه كل طريقة فعليًا

يكشف اختبار التدفق الجانبي (LFA) عن البروتين. تلتقط الأجسام المضادة المثبتة على شريط النيتروسليلوز المستضد الفيروسي أو الطفيلي من العينة، أو الأجسام المضادة الخاصة بالحيوان ضد العامل الممرض، ويجعل المترافق الملون الالتقاط مرئيًا كخط. القراءة ثنائية وبالعين.

يكشف كل من PCR المختبري والتضخيم متساوي الحرارة بجانب الكرسي عن الحمض النووي. تربط البادئات تسلسلًا فريدًا للعامل الممرض، ويقوم الإنزيم بنسخه، وتتراكم إشارة الفلورسنت مع تكاثر النسخ. يقوم تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي بذلك عن طريق تدوير درجة الحرارة؛ تقوم الطرق متساوية الحرارة (LAMP، وRPA، وRHAM والكيمياء ذات الصلة) بذلك عند درجة حرارة واحدة، وهو ما يسمح للأداة بالانكماش إلى حجم اليد.

والنتيجة أساسية: البروتين موجود فقط عندما يتم التخلص من العامل الممرض السليم في موقع أخذ العينات، في حين يمكن العثور على الحمض النووي في وقت مبكر من العدوى، وبأحمال أقل، وفي ذيل التخلص بعد تلاشي إشارة المستضد. يفسر هذا الاختلاف الوحيد معظم فجوة الحساسية التي تمت مناقشتها أدناه.

الحساسية التحليلية والسريرية

الحساسية التحليلية هي مدى ضآلة ما يمكن أن يجده الاختبار في عينة نظيفة. تحتاج أشرطة التدفق الجانبي لفيروسات الكلاب الصغيرة إلى مئات الآلاف إلى الملايين من الجزيئات الفيروسية لكل جرام من البراز قبل ظهور الخط؛ تجد اختبارات الحمض النووي بضع مئات إلى بضعة آلاف من النسخ لكل تفاعل. الحساسية السريرية هي ما يعنيه ذلك لدى المرضى الحقيقيين، والمقارنات المنشورة تضع حساسية التدفق الجانبي لمستضد البراز لفيروسات الكلاب الصغيرة في مكان ما بين حوالي 50 إلى 80 بالمائة مقابل تفاعل البوليميراز المتسلسل، اعتمادًا على يوم المرض، مع خصوصية تزيد عن 95 بالمائة. بعبارات واضحة، نادرًا ما يكذب الكاسيت عندما يكون إيجابيًا، لكنه يفتقد حصة كبيرة من الإصابات الحقيقية.

بالنسبة للمنصة متساوية الحرارة بجانب الكرسي، تشير دراسات التحقق من الصحة المستضافة على صفحة التجارب السريرية لدينا إلى حساسية بنسبة 94.4 إلى 97.0 بالمائة ضد qPCR المختبري عبر المقايسات التي تم تقييمها، مع خصوصية تصل إلى 100 بالمائة أو ما يقرب من ذلك. وهذا يضعه ضمن نقاط قليلة من المختبر، على طاولة الاستشارة، في نفس الزيارة.

نافذة الكشف

يظهر المستضد عندما تتساقط القمم ويختفي عندما يسقط، لذا فإن قراءة الكاسيت في اليوم الأول من العلامات السريرية، أو في اليوم السابع، يمكن أن تكون سلبية في حيوان كان إيجابيًا بقوة في اليوم الثالث. يمكن اكتشاف الحمض النووي منذ فترة الحضانة المتأخرة وحتى فترة النقاهة. بالنسبة لقطط صغيرة بدأت تعطس بالأمس، أو كلب بدأ إسهاله قبل أسبوع، فإن الاختبار الجزيئي ينظر ببساطة من خلال نافذة أوسع.

تمتلك أشرطة الأجسام المضادة المظهر المعاكس: فهي تصبح إيجابية بعد مرور أسبوع إلى ثلاثة أسابيع من التعرض وتبقى إيجابية لمدة أشهر إلى سنوات. يجيبون "هل التقى هذا الحيوان بالعامل الممرض أو اللقاح"، وهو أمر مفيد لفحوصات المناعة وفيروس نقص المناعة البشرية، ولكن ليس "هل هذا الحيوان معدٍ اليوم".

تعدد الإرسال وحالة المتلازمة

مرض الجهاز التنفسي العلوي لدى القطط هو مثال الكتاب المدرسي. فيروسات كاليسي، فيروس الهربس، الميكوبلازما، الكلاميديا، والبورديتيلا القصبية تنتج نفس العطس، الإفرازات والتهاب الملتحمة، والعدوى المشتركة شائعة. لا يمكن لشريط كاسيت ذو هدف واحد حل هذه المشكلة؛ يمكن للوحة المختبرية ذلك، ولكن بعد يومين؛ تعمل بطاقة متساوية الحرارة ذات ستة أهداف على حل المشكلة أثناء الاستشارة وتسمح للطبيب بالاختيار بين مضاد للفيروسات أو الدوكسيسيكلين أو الرعاية الداعمة قبل مغادرة المالك.

أمراض الجهاز التنفسي المعدية في الكلاب هي نفس القصة مع السل، ونظير الأنفلونزا، والفيروس الغدي من النوع 2، والأنفلونزا، والبورديتيلا، والميكوبلازما. تعمل لوحات الجهاز الهضمي على ربط فيروسات البارفو والفيروسات التاجية مع الجيارديا والتريشوموناس. قيمة اللوحة ليست عاملًا ممرضًا إضافيًا؛ المشكلة هي أن الطبيب يتوقف عن تخمين الاختبار الوحيد الذي يجب شراؤه.

التحول وسير العمل والتكلفة لكل إجابة

يعد الكاسيت أرخص وأسرع في الاختبار، وهو الأداة المناسبة عندما يكون احتمال الاختبار المسبق مرتفعًا، وتكون الإجابة ثنائية وسيتم تأكيد النتيجة السلبية على أي حال. تعد لوحة المختبر هي الأكثر تكلفة لكل اختبار بمجرد حساب الشحن والاستشارة الثانية، وهي الأداة المناسبة عند الحاجة إلى قياس الكميات أو هدف غير عادي أو التسلسل. تقع البطاقة متساوية الحرارة بين الاثنين في السعر وتتفوق على كليهما من حيث التكلفة لكل إجابة عندما يكون البديل عبارة عن شريط كاسيت يتبعه إرسال، أو مريض مكفوف يتم علاجه تتبعه زيارة عودة.

سير العمل هو المكان الذي تشعر فيه العيادات بالفرق. تحتاج البطاقة إلى مسحة وأنبوب عازل وماصة؛ لا يوجد استخلاص ولا تحضير للكاشف ولا معالجة للأمبليكون لأن البطاقة مغلقة. يمكن للممرضة تشغيله. يقدم الرصيف تقاريره إلى نظام إدارة التدريب عبر شبكة Wi-Fi أو USB.

حيث لا يحل متساوي الحرارة محل المختبر

يظل القياس الكمي (مراقبة الحمل الفيروسي، والاستجابة للعلاج)، والتسلسل وعلامات المقاومة، والأهداف غير الموجودة على أي بطاقة، والتأكيد الشرعي أو التنظيمي بمثابة عمل مختبري. لا تزال جودة العينات تحد من كل منصة: فالمسحة الجافة المأخوذة من الموقع الخطأ تكون سلبية في كل مكان. وينطبق التحقق من صحة المنصة على الأهداف التي تم التحقق من صحتها من أجلها، وليس على كل اختبار بالامتداد؛ اطلب دراسة العامل الممرض الذي يهمك، وسنرسله أو نقول إنه غير موجود.

قاعدة القرار العملي

احتمالية عالية قبل الاختبار، ممرض واحد، قرار ثنائي: التدفق الجانبي. عرض متلازمة، قرار العلاج اليوم، من غير المرجح أن يعود المالك: بطاقة متساوية الحرارة. تحتاج إلى رقم، أو هدف نادر، أو تسلسل، أو نتيجة يمكن الدفاع عنها قانونًا: تفاعل البوليميراز المتسلسل المختبري. في نهاية المطاف، تقوم معظم العيادات بتشغيل الثلاثة جميعًا، والموزع الذي يمكنه توفير الثلاثة جميعًا من كتالوج واحد، مع بيانات التحقق من الصحة وراء كل منها، هو الذي يحتفظ بالحساب.

تمت كتابته بواسطة فريق منتج Medicare Vet بناءً على بيانات الشركة المصنعة وتوجيهات WOAH والتحقق المنشور. ليس بديلاً عن المشورة البيطرية أو المخبرية في السوق الخاص بك.